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DNA (Desoxyribonukleinsäure) und RNA (Ribonukleinsäure) sind essentielle Biomoleküle, die als Träger genetischer Informationen fungieren und eine zentrale Rolle in der Biologie aller Lebewesen spielen. DNA speichert die genetischen Informationen, die für die Entwicklung, Funktion und Reproduktion von Organismen notwendig sind, während RNA als Vermittler bei der Übertragung dieser Informationen und bei der Proteinsynthese dient. Die strukturellen Unterschiede zwischen DNA und RNA liegen in ihren Zuckerkomponenten und den Basen, die sie enthalten, was ihnen unterschiedliche Funktionen im Zellstoffwechsel verleiht.
Die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) ist eine analytische Methode, die häufig zur Trennung, Identifizierung und Quantifizierung von DNA- und RNA-Bestandteilen verwendet wird. Diese Technik ist besonders wichtig, da sie eine hohe Präzision und Empfindlichkeit bietet, was entscheidend für die Analyse von Nukleinsäuren in der Forschung und Diagnostik ist. Durch die Anwendung von HPLC können Forscher spezifische Nukleotide, Nukleoside und deren Modifikationen effizient analysieren, was unerlässlich für das Verständnis genetischer Prozesse und die Entwicklung therapeutischer Ansätze ist.
Die Begriffe Nucleotid, Oligonucleotid und DNA/RNA beziehen sich auf verschiedene molekulare Größenordnungen in der Analyse von Nukleinsäuren, die durch HPLC untersucht werden können.
1. 100nt 2. 200nt 3. 300nt 4. 400nt 5. 500nt
Säule: RiboSep RNA 50x7.8mm, 2µm
Mobile Phase: A: 0.1M TEA; B: 0.1M TEAA, 25% ACN
Isokratisch: 15min
Injektionsvolumen: 10µL
1. n-2 ( 5'-AAA AGT CCG TGA GA-3' ; 16.4 min)
2. n-1 ( 5'-CAA AAG TCC GTG AGA-3' ; 17.1 min)
3. 16mer (5'-ACA AAA GTC CGT GAG A-3' ; 17.8 min)
Testbedinungen:
A: 0.025 M Tetrabutylammoniumbromid (TBuABr)
B: 0.025 M TBuABr, 50% CH3CN; 10-90% B in 17 min, 60-100% B in 1 min, 100-10% B in 1 min
Temperatur: 60°C
Injektionsvolumen: 5 µL
UV-Detektion: 260 nm
siRNA - Reversed Phase:
DNA - Reversed Phase:
DNA - SEC:
DNA Fragmente - IEX:
RNA - IEX:
tRNA, rRNA, DNA - IEX:
DNA - IEX:
DNA - SEC:
DNA - Reversed Phase:
DNA Digest - IEX:
CNT-DNA - HILIC:
dsRNA, mRNA, ssRNA - Reversed Phase:
dsRNA, ssRNA - SEC:
DNA - Reversed Phase:
DNA - IEX:
DNA - SEC:
RNA - IEX:
RNA - SEC:
mRNA - Reversed Phase:
mRNA - SEC:
mRNA - Affinitätschromatographie:
circular RNA - Reversed Phase:
circular RNA - SEC:
circular mRNA - SEC:
mRNA - Reversed Phase:
tRNA - IEX:
mRNA - Reversed Phase:
mRNA - IEX:
DNA - Reversed Phase:
DNA - IEX:
dsDNA - IEX:
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