AMT - Advanced Materials Technology / HALO Glycan

HALO Glycan

Die Halo Glycan Säulen von Advanced Materials Technology ist die neueste Erweiterung der Halo Fused-Core BioClass Familie. Sie ist speziell für Trennungen von Oligosacchariden und Protein-verlinkten Glycanen und Glycopeptiden durch HILIC, H(ydrophilic) I(nteraction) LI(quid) C(hromatography), konzipiert.

Chemischer Aufbau:

  • Hoch polarer Ligand mit 5 Hydroxyl-Gruppen
  • Ligand gebunden an 2.7µm Fused Core Silica mit neuer Linkage Chemie
  • Fused-Core Partikel mit 135 m2/g Oberfläche und 90A Porenweite

Für Trennungen von:

  • Oligosacchariden
  • Protein-verlinkte Glycane und Glycopeptiden
  • Beispiel-Applikation: RNGase-Released and Labeled N-Glycans

Zur Qualitätssicherung QS wird mit jeder Charge des Glycan Packungsmaterials die Trennung von einem Dextran Standard getestet. Es handelt sich um eine Procainamid-gelabelte Glycan Leiter, die aus Oligosacchariden von 2-25 Glycoseeinheiten besteht. Die Peaks für 5 und 10 Glucoseeinheiten müssen enge Spezifikationen im Hinblick auf Retention und Peakbreite erfüllen.

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AMT-92910-705
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Applikationen

Abtrennung von Procainamid-markierten Dextran-Standards auf HALO Glycan

Eine HALO Glycan-Säule zeigt eine effiziente Trennung von Procainamid-markierten Dextran-Standards (Sigma-Aldrich 1:1 (w/w) der Teilenummern 00268 und 00269) bei 0,5 µg/µL in 70% ACN/30% Wasser. Jede Charge der HALO-Glycan-Packung wird mit dieser Probe getestet, um die Reproduzierbarkeit und Leistung von Charge zu Charge sicherzustellen.

TESTBEDINGUNGEN

  • Säule: 2.1 x 150 mm, HALO 2.7 μm Glycan
  • Art. Nr.: 92922-705
  • Mobile Phase A: 50 mM Ammoniumformiat,
    pH 4.45
  • Mobile Phase B: Acetonitril
  • Gradient: 80-55% B in 25 min
  • Flussrate: 0.6 mL/min.
  • Druck: 190 bar
  • Temperatur: 60°C
  • Detektion: UV 300 nm
  • Injektionsvolumen: 3 μL Probe
  • Probenlösungsmittel: 70/30 ACN/Wasser
  • Response Time: 0.5 sec.
  • Datanrate: 3.3 Hz
  • Flusszelle: 2.5 μL semi-micro
  • LC System: Shimadzu Nexera

Trennung von PNGase-freigesetzten und markierten N-Glykanen durch HILIC unter Verwendung der HALO-Glykansäule

Eine schnelle Trennung von PNGase-freisetzenden und Procainam-markierten N-Glykanen von Ribonuclease B wird mit einer HALO-Glykan-Säule erreicht.

PEAKIDENTITÄTEN:

  1. PAm-GlcNAc2Man5
  2. PAm-GlcNAc2Man6
  3. PAm-GlcNAc2Man7
  4. PAm-GlcNAc2Man8
  5. PAm-GlcNAc2Man9

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