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HALO Glycan
Die Halo Glycan Säulen von Advanced Materials Technology ist die neueste Erweiterung der Halo Fused-Core BioClass Familie. Sie ist speziell für Trennungen von Oligosacchariden und Protein-verlinkten Glycanen und Glycopeptiden durch HILIC, H(ydrophilic) I(nteraction) LI(quid) C(hromatography), konzipiert.
Chemischer Aufbau:
- Hoch polarer Ligand mit 5 Hydroxyl-Gruppen
- Ligand gebunden an 2.7µm Fused Core Silica mit neuer Linkage Chemie
- Fused-Core Partikel mit 135 m2/g Oberfläche und 90A Porenweite
Für Trennungen von:
- Oligosacchariden
- Protein-verlinkte Glycane und Glycopeptiden
- Beispiel-Applikation: RNGase-Released and Labeled N-Glycans
Zur Qualitätssicherung QS wird mit jeder Charge des Glycan Packungsmaterials die Trennung von einem Dextran Standard getestet. Es handelt sich um eine Procainamid-gelabelte Glycan Leiter, die aus Oligosacchariden von 2-25 Glycoseeinheiten besteht. Die Peaks für 5 und 10 Glucoseeinheiten müssen enge Spezifikationen im Hinblick auf Retention und Peakbreite erfüllen.
Applikationen
Abtrennung von Procainamid-markierten Dextran-Standards auf HALO Glycan
Eine HALO Glycan-Säule zeigt eine effiziente Trennung von Procainamid-markierten Dextran-Standards (Sigma-Aldrich 1:1 (w/w) der Teilenummern 00268 und 00269) bei 0,5 µg/µL in 70% ACN/30% Wasser. Jede Charge der HALO-Glycan-Packung wird mit dieser Probe getestet, um die Reproduzierbarkeit und Leistung von Charge zu Charge sicherzustellen.
TESTBEDINGUNGEN
- Säule: 2.1 x 150 mm, HALO 2.7 μm Glycan
- Art. Nr.: 92922-705
- Mobile Phase A: 50 mM Ammoniumformiat,
pH 4.45 - Mobile Phase B: Acetonitril
- Gradient: 80-55% B in 25 min
- Flussrate: 0.6 mL/min.
- Druck: 190 bar
- Temperatur: 60°C
- Detektion: UV 300 nm
- Injektionsvolumen: 3 μL Probe
- Probenlösungsmittel: 70/30 ACN/Wasser
- Response Time: 0.5 sec.
- Datanrate: 3.3 Hz
- Flusszelle: 2.5 μL semi-micro
- LC System: Shimadzu Nexera
Trennung von PNGase-freigesetzten und markierten N-Glykanen durch HILIC unter Verwendung der HALO-Glykansäule
Eine schnelle Trennung von PNGase-freisetzenden und Procainam-markierten N-Glykanen von Ribonuclease B wird mit einer HALO-Glykan-Säule erreicht.
PEAKIDENTITÄTEN:
- PAm-GlcNAc2Man5
- PAm-GlcNAc2Man6
- PAm-GlcNAc2Man7
- PAm-GlcNAc2Man8
- PAm-GlcNAc2Man9
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