Hydrophobe Interaktionschromatographie (HIC)

Die hydrophobe Interaktionschromatographie (HIC) ist eine spezielle Methode, die für die Trennung von Biomolekülen unter Ausnutzung ihrer hydrophoben Eigenschaften eingesetzt wird. Diese Methode spielt eine zentrale Rolle in der Aufreinigung und Analyse von Proteinen, Peptiden und anderen Makromolekülen, insbesondere wenn die Erhaltung der nativen Struktur und Funktion der Moleküle von Bedeutung ist.

 

Die Trennung basiert auf den Wechselwirkungen von hydrophoben Bereichen der Proteine mit einer schwach hydrophoben stationären Phase. Die Analyten werden daher nach dem Grad ihrer Oberflächenpolarität getrennt. Proteine mit hoher Oberflächenhydrophobie, werden durch die stationäre Phase stärker zurückgehalten als solche deren hydrophoben Bereiche vermehrt im Inneren des Proteins zu finden sind. Diese Wechselwirkungen zwischen Protein und stationärer Phase werden durch den Zusatz von Salzen zu einer gepufferten mobilen Phase zusätzlich stark erhöht, da die Löslichkeit der Proteine durch die Anwesenheit der Salze erniedrigt wird und somit die hydrophoben Interaktionen des Proteins mit der stationären Phase zunehmen. Durch einen absteigenden Salzgradienten werden die Proteine von der Säule eluiert. Die mobile Phase ist hierbei rein wässrig und frei von organischen Lösungsmitteln, da diese zu Denatureriung der zu analysierenden Proteine führen können.

 

Finden Sie hier eine Übersicht an Herstellern und HILC-HPLC-Säulen. Gerne stehen wir Ihnen bei der Auswahl der passenden Säule für Ihre analytische Fragestellung zur Seite!

Produkte

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Partikelgröße
Modifizierung
Modifizierung (Hersteller)
Porengröße
Spezifische Oberfläche [m2/g]
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Technologie
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Technische Daten

Hersteller und Säulen der hydrophoben Interaktionschromatographie

Shodex™

Name

Functional Group

Particle Size

Pore Size

Column Size

HIC PH-814

Phenyl

10 µm

2000 Å

8.0 x 75 mm

Base Material: Polyhydroxymethacrylate

Tosoh Bioscience™

Name

Functional Group

Particle Size

Pore Size

Column Size

TSKgel Ether 5-PW

Polyether

10 µm

1000 Å

5.0 x 50 mm[1]
8.0 x 75 mm[1]
2.0 x 75 mm[2]
7.5 x 75 mm[2]

TSKgel Phenyl 5-PW

Phenyl

10 µm

1000 Å

5.0 x 50 mm[1]
8.0 x 75 mm[1]
2.0 x 75 mm[2]
7.5 x 75 mm[2]
21.5 x 150 mm[3]

TSKgel BioAssist Phenyl

Phenyl

10 µm

1000 Å

7.8 x 50 mm[4]

TSKgel Butyl-NPR

Butyl

2.5 µm

Non-porous

4.6 x 35 mm[2]
4.6 x 100 mm[2]

Base Material: Polymethacrylate; [1] Glassäulen; [2] Edelstahlsäulen; [3] Partikelgröße 13 µm; [4] PEEK Säule

Thermo Scientific™

Name

Functional Group

Particle Size

Pore Size

Column Size

MAbPac HIC-10[1]

Proprietary polyamide

5 µm

1000 Å

4.6 x 100 mm
4.6 x 250 mm

MAbPac HIC-20[1]

Proprietary alkylamide

5 µm

1000 Å

4.6 x 100 mm
4.6 x 250 mm

MAbPac HIC-Butyl[2]

Butyl

5 µm

Non-porous

4.6 x 100 mm

ProPac HIC-10[1]

Proprietary alkylamide

5 µm

300 Å

7.8 x 75 mm
2.1 x 100 mm
4.6 x 100 mm
4.6 x 250 mm

 [1] Base Material: Silica Gel; [2] Base Material: Hydrophilic Polymer

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