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Glycan
Glycane - Analytik von Oligo- und Polysacchariden, Glykoproteinen und anderen verwandten Substanzen
Glycane sind Polysaccharide, d. h. große organische Moleküle, die aus vielen einzelnen glykosidisch verknüpften Monosaccharidbausteinen bestehen. Ferner bezeichnet in der Literatur der Begriff "Glycan" auch bestimmte Kohlenhydratteile von Glykokonjugaten, z. B. von Glykoproteinen oder Glykolipiden. Bekannte Substanzen, die zu den Glykanen zählen sind sind z. B. Cellulose, Chitin oder Heparin. Kohlenhydrate bzw. deren Konjugate sind von enormer physiologischer Bedeutung bei Pflanzen, Tieren und Menschen.
Die Analytik von Glycanen erfolgt häuftig mittels HPLC-(MS), wobei in Abhängigkeit des Analyten verschiedene Trenntechniken verwendet werden können.
Applikationen
Abtrennung von Procainamid-markierten Dextran-Standards auf AMT HALO Glycan
Die HALO® GLYCAN Core-Shell-Säulen von AMT sind speziell für die Analytik von Glycanen entwickelte HPLC Säulen. Diese eignen sich hervorragend für die Analyse von Oligosacchariden und weiteren Kohlenhydratresten, die z. B. von Glykoproteinen und Proteoglykanen abstammen. Die funktionelle Gruppe ist ein neuartiger Ligand, der 5 Hydroxyl-Gruppen enthält, welcher über einen speziellen Linker an die Fused-Core Silikapartikel gebunden sind. Idealerweise werden diese Säulen im HILIC-Trennmodus verwendet.
Testbedingungen
- Säule: 2.1 x 150 mm, HALO 2.7 μm Glycan (92922-705)
- Mobile Phase A: 50 mM Ammoniumformiat, pH 4.45
- Mobile Phase B: Acetonitril
- Gradient: 80-55% B in 25 min
- Flussrate: 0.6 mL/min.
- Druck: 190 bar
- Temperatur: 60°C
- Detektion: UV 300 nm
- Injektionsvolumen: 3 μL Probe
- Probenlösungsmittel: 70/30 ACN/Wasser
- Response Time: 0.5 sec.
- Datanrate: 3.3 Hz
- Flusszelle: 2.5 μL semi-micro
- LC System: Shimadzu Nexera
Glycan Trennung mit Sepax Proteomix SAX-NP3
Für die Trennung von verschiedenen Glycanen, Glykoproteinen und weiteren Substanzen mittels Ionenaustauschchromatographie bietet Sepax die Proteomix SAX HPLC Säulen an.
Testbedingungen
Säule: Proteomix SAX-NP3 50x4.6mm (403NP3-4605)
Mobile Phase A: 80/20 Wasser/Acetonitril
Mobile Phase B: 80/20 250 mM Ammoniumformiat, pH 4.5/Acetonitril
Gradient:
Zeit / min | %B |
1 | 0 |
5.55 | 65 |
5.65 | 100 |
7.65 | 100 |
7.75 | 0 |
14 | 0 |
Flussrate: 1 mL/min
Detektor: Fluoreszenz, Anregung 260nm, Emission 430 nm
Injektionsvolumen: 3 µL
Probe: N-Linked Glycans Bovine Fetuin (6.7 pmol/µL)
Downloads
Hersteller Übersicht
AMT
HPLC - HILIC:
- HALO Glycan
Sepax
HPLC - IEX:
- Proteomix SAX-NP10
- Proteomix SAX-NP3
- Proteomix SAX-NP5
HPLC - SEC:
- Zenix SEC-150, 3µm
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