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Monoklonale Antikörper (mAb´s) sind immunologisch aktive Proteine, die in den letzten Jahren in zunehmenden Maße in den Fokus der medizinischen Forschung gerückt sind. Heutzutage bestehen bereits eine Vielzahl moderner Pharmaka und Therapieansätze, die auf monoklonalen Antikörpern basieren
Die Analytik von monoklonalen Antikörpern hat meist zum Ziel Monomere von Dimeren, Trimeren und weiteren Aggregaten abzutrennen, da diese die Effektivität von Biopharmazeutika negativ beeinflussen können. Weiterhin lassen sich auch verschiedene Fragmente von mAb´s analysieren, z. B. Fc– oder Fab-Fragmente. Die Analytik von monoklonalen Antikörpern kann mit unterschiedlichen chromatographischen Trenntechniken durchgeführt werden.
Die SEC ist eine sehr geeignete und breit angewendete Methode für die Bestimmung von Aggregat-, Monomer- und Fragment-Gehalten von mAb´s in Analytlösungen. Die folgenden Hersteller bieten geeignete Säulen dafür an:
Die Trennung bei der Hydrophilen Interaktionschromatographie basiert auf der unterschiedlichen Oberflächenhydrophobizität von verschiedenen Proteinen. Ist dies für die jeweiligen Analyten gegeben, so lassen sich mittels HIC verschiedene Antikörper voneinander trennen, Antikörper von anderen Proteinen abtrennen aber auch Antikörperaggregate von Monomeren separieren. Die Trennung von Antikörperfragmenten ist ebenfalls möglich. Die folgenden Hersteller bieten geeignete Säulen dafür an:
Die Hydrophobizität der genannten Phasen sinkt in folgender Reihenfolge: Phenyl-5PW > Ether-5PW > Butyl-NPR
Mit Ionenaustauschchromatographie lassen sich verschiedene Antikörper, –Fragmente, –Aggregate und weitere Proteine voneinander trennen.
Auch mittels der Reverserd-Phase Chromatographie lassen sich unterschiedliche monoklonale Antikörper analysieren.