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Die Analytik organischer Säuren ist in vielen Bereichen von Forschung und Industrie von großer Bedeutung. So z.B. in der Analytik von Wein, Bier oder Fruchtsäften oder im Zusammenhang mit der Analyse von Kohlenhydraten.
Eine wichtige chromatographische Trennmethode für die Analytik organischer Säuren ist die Ionenausschluss-Chromatographie (IEC). Dafür werden als stationäre Phase meist Polymerharze verwendet, die an der Oberfläche Sulfonsäuregruppen (-SO3H) tragen. Durch eine schwach saure mobile Phase, liegen die Sulfonsäuregruppen z.T. deprotoniert vor, wodurch die Oberfläche nach außen hin negativ geladen ist. Die Analyten liegen in Abhängigkeit der mobilen Phase und deren pKa-Wert mehr oder weniger in folgendem Gleichgewicht vor: R-COO‒ + H+ ↔ R-COOH.
Dissoziierte Analyten können somit das Porensystem der stationären Phase nicht durchdringen und werden ausgeschlossen, wohingegen Analyten im undissoziierten Zustand retardiert werden. Die Trennung erfolgt somit größtenteils nach dem pKa-Wert der Analyten. Die Ionenausschlusschromatographie kann ebenfalls für die simultane Trennung von Zuckern und organischer Säuren verwendet werden.
Weitere geläufige chromatographische Trennmethoden für organische Säuren sind die Umkehrphasenchromatographie (RP-HPLC) und die hydrophile Interaktionschromatographie (HILIC).
1. Lactic acid 2. Formic acid 3. Acetic acid 4. Propionic acid 5. Isobutyric acid 6. Butyric acid 7. Isovaleric acid 8. Valeric acid 9. Isocaproic acid 10. Caproic acid 11. Heptanoic acid
Säule: Coregel 87H3 300x7.8mm, 9µm
Mobile Phase: 8 nM H2SO4
Flussrate: 0.6 mL/min
Temperatur: 80 °C, 65 °C, 50 °C
1. Malic acid 2. Lactic acid 3. Acetic acid 4. Maleic acid 5. Citric acid 6. Succinic acid 7. Fumaric acid
Säule: Inertsil ODS-4 250x4.6mm, 5µm
Mobile Phase: 20 mM NH4H2PO4, pH 2
Flussrate: 1 mL/min
Temperatur: 40 °C
Detektion: UV, 210 nm
Injektionsvolumen: 5 µL
1. Succinic acid 2. Lactic acid 3. Sodium gluconate 4. Malic acid 5. Glyoxylic acid 6. Fumaric acid 7. Malonic acid 8. Citric acid 9. Tartaric acid 10. Maleic acid
Säule: Union UK-Amino 250x3mm, 3µm
Mobile Phase A: 30/70/0.1 Wasser/Acetonitril/Ameisensäure
Mobile Phase B: 100/2 Wasser/Ameisensäure
Gradient: 10-60%B in 25min, 100%B für 25 bis 60min
Flussrate: 0.4 mL/min
Temperatur: 37 °C
Detektion: ELSD (Sprühkammer 190°C, Drift Tube 42 °C)
Injektionsvolumen: 10 µL
UHPLC - Reversed Phase:
HPLC - Reversed Phase:
HPLC - Reversed Phase:
HPLC - Ion Exclusion:
HPLC - HILIC:
HPLC - Reversed Phase:
HPLC - Reversed Phase:
HPLC - Ion Exclusion:
HPLC - Ion Exclusion:
HPLC - Reversed Phase:
HPLC - Reversed Phase:
HPLC - Reversed Phase:
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